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液氮超低溫保藏技術(shù)簡(jiǎn)介

發(fā)布時(shí)間:2019-11-05 11:33:56 瀏覽:1618次

液氮超低溫保藏技術(shù)是將菌種保藏在-196 ℃的液態(tài)氮,或在-150 ℃的氮氣中的長(cháng)期保藏方法,它的原理是利用微生物在-130 ℃以下新陳代謝趨于停止而有效地保藏微生物。液氮罐廠(chǎng)家介紹其操作步驟如下:

1、安瓿管或凍存管的準備

用圓底硼硅玻璃制品的安瓿管,或螺旋口的塑料凍存管。注意玻璃管不能有裂紋。將凍存管或安瓿管清洗干凈,121 ℃下高壓滅菌(15~20) min,備用。

2、保護劑的準備

保護劑種類(lèi)要根據微生物類(lèi)別選擇。配制保護劑時(shí),應注意其濃度,一般采用10 %~20 %甘油。

液氮超低溫保藏技術(shù)簡(jiǎn)介

3、微生物保藏物的準備(如何為微生物保藏物做準備?)

4、預凍(如何為物質(zhì)做預凍處理?)

5、保藏

將安瓿管或塑料凍存管置于液氮罐中保藏。一般氣相中溫度為-150 ℃,液相中溫度為-196℃。

6、復蘇方法

液氮罐中取出安瓿管或塑料凍存管,應立即放置在38 ℃~40 ℃水浴中快速復蘇并適當搖動(dòng)。直到內部結冰全部溶解為止,一般約需50 s~100 s。開(kāi)啟安瓿管或塑料凍存管,將內容物移至適宜的培養基上進(jìn)行培養。

*后,通過(guò)操作,根據自身實(shí)驗體會(huì ),比較幾種菌種保藏方法的利弊,做出*終的答案。特別提醒大家在操作時(shí)一定要注重自身安全,做好防護措施。


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